犬类细小为什么会测不出来?
目前市面上用于犬猫临床上的病毒检测卡大多都属于酶标免疫诊断技术范畴,是将生物化学中的酶放大效应和免疫学的高特异性特点结合为一体的生物学检测技术。目前的犬瘟热、犬细小病毒诊断卡均是应用的双抗体夹心免疫测定方法。
该方法是用纯化后的病毒抗原进行免疫动物(抗原诱导),获取符合要求的免疫抗体后,从动物体内直接提取或通过细胞培养法获得纯净的特异性强、效价高的抗体蛋白,随后把其中一种抗体蛋白固相化吸附到诊断卡的待测区(检测线),另一种抗体经酶蛋白(辣根过氧化物酶)标记后同样固相化吸附到诊断卡的质控区(对照线),同时将捕捉抗体固定在诊断笔内。使用时,将诊断笔从诊断卡中抽出,将诊断笔插入病犬肛门内旋转一圈采集待检样本,样本中的病毒抗原即可与诊断笔内捕捉抗体相结合。随后将诊断笔插入诊断卡内毛细孔中,样本随毛细作用在 NC 膜上移动。当样本流经诊断卡检测线,如果样本中含有的病毒抗原符合诊断 卡所要求的检测抗原型别,即可与检测线内的抗体结合,形成肉眼可见的红色线条。样本流经对照线时,被固定在对照线中的酶标抗体捕获,形成红色线条(对照线)。当对照线、检测线都出现红色线条时即表示病毒抗原检测阳性;当只有对照线出现红色线条,检测线无红线出现时表示病毒抗原检测阴性;当对照线、检测线都无红线出现,提示检测无效,需重新再检。因此,诊断卡的有效性可由对照线验证。对照线、检测线的判定应以 10 分钟内的效果为准。
影响犬瘟热、犬细小病毒诊断试剂实际检测效果的因素较多,除病毒诊断试剂本身的试剂质量、保存条件以及犬感染病毒的毒 种因素外, 还有动物机体产生交叉反应、免疫水平、年龄及样本采集取样的时机和质量, 以及检测时的外界条件等的影响。